简介：

甲基绿又称双绿SF，是具有金属光泽的绿色微结晶或粉末，分子量为608.78，分子式为 C27H35Cl4N3Zn。它易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。绿色晶体，具金黄色光泽，或淡绿色粉末。溶于水，呈蓝绿色。微溶于乙醇，不溶于乙醚、戊醇。

甲基绿染色液(1%)在组织或细胞染色中对细胞核进行染色，常用于鉴定DNA，细胞核中的 DNA遇甲基绿会被染成蓝绿色，亦可用于免疫荧光染色或免疫组化染色。10ml染色液可以染色20个样本。

保存条件：

室温保存。

自备材料：

1、4%多聚甲醛

2、蒸馏水

3、系列乙醇

操作步骤(仅供参考)：

1、样品处理

a)对于石蜡切片：

二甲苯中脱蜡。

更换新鲜的二甲苯，再脱蜡5～10min。

无水乙醇5min。

乙醇2min。

乙醇2min。

蒸馏水2min。

b)对于冰冻切片：

蒸馏水2min。

c)对于培养细胞：

用多聚甲醛固定10min以上。

蒸馏水洗涤2min。

更换新鲜的蒸馏水，再洗涤2min。

2、甲基绿染色

a) 对于上述处理好的样本，用Methyl Green Stain(1%)染色5～10min。

b)用蒸馏水冲洗2次，此时样本呈蓝色。

c) 乙醇处理5s。

d)用乙醇洗涤2次，直接观察或按下列组织切片操作步骤进行。

3、 组织切片染色

a) 乙醇脱水2min。

b) 更换新鲜的乙醇再脱水2min。

c) 二甲苯透明5min。

d) 二甲苯透明5min。

e) 中性树胶或其它封片剂封片。

f) 显微镜下观察，细胞核呈绿色或蓝绿色。

4、荧光染色

a) 如果进行免疫荧光染色，在甲基绿染色液染色后，乙醇洗涤2次，每次2min。

b) 乙醇脱水2min。

c) PBS或生理盐水或TBS等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5min。

d) 进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色。

染色结果：

注意事项：

1、首次使用本染液时建议先取1~2个样品做预实验。

2、甲基绿染色可以根据染色结果和要求调整时间。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。